Incucyte® Caspase-3/7 boja za apoptozu
Incucyte® Caspase-3/7 boje za apoptozu formulirane su za otkrivanje apoptoze (stanične smrti) u živim stanicama. Boje su prilagođene za kvantifikaciju stanica u stvarnom vremenu koje prolaze kroz apoptozu posredovanu kaspazom-3/7. Dodatak Incucyte® Caspase-3/7 Green, Red ili Metabolism Dyes zdravim stanicama ne ometa rast i morfologiju stanica. Kada se koriste s Incucyte® uređajem za praćenje stanica u stvarnom vremenu i pripadajućim programskim rješenjem, ovi reagensi omogućuju pouzdanu i točnu procjenu stanične smrti.
Incucyte® Caspase-3/7 boje za apoptozu vežu aktivirani motiv prepoznavanja kaspaze-3/7 (DEVD) s interkalirajućom DNA bojom. Kada se reagens doda u medij kulture tkiva, inertni, nefluorescentni supstrat prolazi kroz staničnu membranu gdje ga cijepa aktivirana kaspaza-3/7, što dovodi do oslobađanja interkalirajuće DNA boje i fluorescentnog bojenja DNA u jezgri. S Incucyte® integriranim programom za analizu, fluorescentni objekti mogu se kvantificirati, a pozadinska fluorescencija minimizirati. Ovi reagensi su validirani za upotrebu sa Incucyte® uređajima i omogućuju procjenu stanične apoptoze u stvarnom vremenu izazvane farmakološkim agensima i/ili genetskim i okolišnim čimbenicima.
Skladištenje i stabilnost boja
Boje se isporučuju kao otopine u jednoj bočici u dimetil sulfoksidu (DMSO). Svaka bočica daje dovoljnu količinu za izvođenje 100-200 testova (jedan test je jedna jažica mikrotitarske ploče s 96 jažica). Po primitku, boje Incucyte® Caspase-3/7 treba čuvati na temperaturi od 4°C do šest mjeseci.
Preporučena upotreba
Preporučujemo razrjeđivanje Incucyte® Caspase-3/7 boja u cijelom mediju kulture i dodavanje izravno stanicama u kulturi, prema smjernicama u nastavku:
- Incucyte® Caspase-3/7 Green: 1:1000 u mediju kulture, za konačnu koncentraciju testa od 5 μM
- Incucyte® Caspase-3/7 Red: Optimizirajte konačnu koncentraciju testa razrjeđivanjem reagensa 1:200 u cijelom mediju, zatim napravite niz dvostrukih razrjeđenja za konačne koncentracije testa od 2,5, 1,25 i 0,5 µM
- Incucyte® Caspase-3/7 za metabolizam: 1:1000 u mediju kulture, za konačnu koncentraciju testa od 1 μM.
Kompatibilno s uređajima Incucyte® SX5, Incucyte® S3 i Incucyte® SX1 za analizu živih stanica.
