Ultroser™ G zamjena za serum
Značajke i prednosti:
- poludefinirani sastav koji osigurava ponovljivost serije u seriju
- nizak sadržaj proteina
- jednostavno korištenje i skladištenje
- ima koncentraciju pet puta veću od fetalnog telećeg seruma (2% rekonstituirane supstitucije Ultroser G seruma ekvivalentno je 10% fetalnog telećeg seruma u bazalnom mediju)
- namijenjen je isključivo za istraživačku upotrebu i nije namijenjen za dijagnostičke postupke.
Često postavljana pitanja
Ultroser™ G je poludefinirana zamjena za serum koja se može koristiti kao zamjena za FCS (fetalni goveđi serum) / FBS (fetalni goveđi serum) u kulturama životinjskih stanica.
Budući da se Ultroser™ G sastoji od bioloških i kemijskih sirovina, smatra se poludefiniranim medijem.
Dizajniran je za in vitro kulturu stanica koje ovise o podlozi i koristi se isključivo za istraživačku svrhu. Nije namijenjen za proizvodnju niti za uporabu na ljudima ili životinjama.
Biološka aktivnost je 5 puta veća nego kod FBS-a.
Ultroser™ G se isporučuje u zapečaćenim bočicama u obliku liofiliziranog praha, koji se prije uporabe rekonstituira u 20 mL.
Sadrži sastojke životinjskog porijekla iz goveda i ljudi. Materijal goveđeg porijekla potječe iz SAD-a i/ili Novog Zelanda i ne pokazuje znakove bolesti.
Ne dolazi iz:
distalnog ileuma tankog crijeva ili krajnika kanadskih goveda bilo koje dobi,
mozga, lubanje, očiju, trigeminalnih ganglija, kralježnične moždine, dorzalnih ganglija, kralježnice (uključujući repne kralješke, poprečne nastavke torakalnih i lumbalnih kralježaka, te krila sakruma).
Preostali sastojci su sintetskog podrijetla. Formulacija je povjerljiva i nije dostupna.
Za proizvode namijenjene isključivo in vitro istraživanju ne izdaje se TSE/BSE izjava.
Ultroser™ G je u obliku liofiliziranog praha. Dostavlja se na sobnoj temperaturi, a čuva se na 2–8°C. Nakon rekonstitucije, otopinu treba brzo upotrijebiti ili pohraniti smrznutu na -20°C do 6 mjeseci. Treba izbjegavati često zamrzavanje i odmrzavanje.
Rok trajanja je do 4 godine od datuma liofilizacije. Kupci će dobiti proizvod s najmanje 6 mjeseci roka trajanja.
Nakon rekonstitucije, Ultroser™ G ima 5 puta veću biološku aktivnost od FBS-a. Koristi se u koncentracijama između 0,5% i 4% (što odgovara 2,5% do 20% FBS-a).
Uobičajena koncentracija je 2% (što odgovara 10% FBS-a).
Za standardnu koncentraciju, pomiješajte 2% Ultrosera™ G sa 98% baznog medija.
Za svaki tip stanica potrebno je testirati optimalnu koncentraciju jer učinak na rast nije uvijek proporcionalan koncentraciji.
1. Otvorite bočicu lomeći vrh kapsule.
2. Dodajte 20 mL sterilne, pirogen-free destilirane vode pomoću sterilne pipete ili štrcaljke.
3. Ostavite da bubri 10–15 minuta. Otopite blagim mućkanjem ili aspiracijom pomoću pipete/štrcaljke.
Otopina treba biti bistra i ružičaste boje.
Po želji filtrirati kroz sterilni filter 0,2 µm (bez gubitka aktivnosti).
Može se koristiti isti kao s FBS-om (npr. MEM), ali se preporučuju obogaćeni mediji: HAM’s F12, DMEM, IMDM ili RPMI.
Podloga je ista kao s FBS-om. Ultroser™ G sadrži adhezijske faktore, pa se može koristiti i za predinkubaciju posudica prije dodavanja stanica.
Za teže uzgojive stanice može se poboljšati adhezija korištenjem: pol-D-lizina, kolagena, izvanstanične matrice ili faktora poput fibronektina.
Tehnike tripsinizacije su iste kao s FBS-om. Trajanje treba biti što kraće.
Za uklanjanje ostataka tripsina može se dodati inhibitor tripsina (npr. sojin ekstrakt ili aprotinin, 0,5–1 mg/mL).
Ako se stanice i dalje grupiraju, suspenziju proći kroz sito od 40 μm.
Dvije metode:
- Izravni prijenos u medij s Ultroser™ G
- Postupna prilagodba smanjenjem FBS-a kroz više pasaža:
1. pasaža: 50% FBS medij + 50% Ultroser™ G medij
2. pasaža: 25% FBS + 75% Ultroser™ G
3. pasaža: 10% FBS + 90% Ultroser™ G
4. pasaža: 100% Ultroser™ G
Prije sijanja stanica provjeriti pH medija i po potrebi podesiti na 7,2 ± 0,1. Može se dodati natrijev bikarbonat ili HEPES za poboljšanje puferske sposobnosti.
