Sartobind® Phenyl membrane za kromatografiju

Hidrofobna interakcijska kromatografija (HIC) odvaja i pročišćava biomolekule na temelju razlika u njihovoj hidrofobnosti. Fenilni membranski adsorber slijedi ista pravila poznata iz konvencionalne kromatografije hidrofobnih interakcija. Zbog velike veličine pora, membranski adsorberi pokazuju izvrsna svojstva protoka. Gotovo da nema ograničenja difuzije prijenosa mase u usporedbi s konvencionalnom kromatografijom kuglica. Puferi s visokim koncentracijama soli potiču adsorpciju proteina na matrici hidrofobne membrane. Proteini se eluiraju smanjenjem koncentracije soli u puferu za eluiranje.

Ovisnost membrane o soli usporediva je s onom kod kolona s amonijevim sulfatom, natrijevim kloridom i natrijevim citratom.

Primjena:

HIC je moćna metoda za razlikovanje ciljnih proteina i hidrofobnih kontaminanata. Veliki se proteini vežu jače od malih, a agregiraju se čak znatno bolje od monomera zbog pričvršćivanja na više točaka.

Pufer visoke ionske jakosti, obično amonijev sulfat, prvo se dodaje u otopinu proteina. Ioni soli u ovoj otopini smanjuju otapanje otopljenih tvari u uzorku. Kako se solvatacija smanjuje, hidrofobna područja koja postanu izložena adsorbira hidrofobna matrica membrane. U HIC membrani, fleksibilna celuloza se koristi kao okosnica za fenilni ligand. Membrana se može regenerirati pomoću vode ili alkohola.

HIC membrana se koristi za uklanjanje:

• agregata
• proteina stanice domaćina
• virusa
• endotoksina
• lipida, boja, deterdženata i sredstava protiv pjenjenja
• liganada izlužene kromatografije

Fenilna membrana se također može koristiti za vezanje velikih proteina kao što su:

• monoklonska antitijela
• konjugirana cjepiva, virusi i fagi
• oligonukleotidi

Prednosti:

HIC membrane nude sljedeće prednosti u odnosu na konvencionalne HIC kolone:

• izvrsna redukcija agregata
• 85 % međuspremnika
• 75 % ušteđenog vremena

Jednostavan za korištenje:

• Plug & play uređaji od 0,08 ml do 5 l
• može se koristiti kao filter
• brzina protoka do 5 volumena sloja/min
• za višekratnu upotrebu >100 ciklusa ili za jednokratnu upotrebu