Sartobind® Phenyl membrana za kromatografijo

Hidrofobna interakcijska kromatografija (HIC) ločuje in čisti biomolekule na podlagi razlik v njihovi hidrofobnosti. Fenilni membranski adsorber sledi enakim pravilom kot konvencionalna hidrofobna interakcijska kromatografija. Zaradi velike velikosti por membranski adsorberji omogočajo odlično pretočnost. V primerjavi s konvencionalno kromatografijo s kroglicami skorajda ni omejitev difuzije prenosa mase. Pufri z visoko koncentracijo soli spodbujajo adsorpcijo proteinov na hidrofobni membranski matrici. Proteini se eluirajo z zmanjšanjem koncentracije soli v eluacijskem pufru.

Odvisnost membrane od soli je primerljiva s tisto pri kolonah z amonijevim sulfatom, natrijevim kloridom in natrijevim citratom.

Uporaba:

HIC je zmogljiva metoda za razlikovanje ciljnih proteinov in hidrofobnih kontaminantov. Veliki proteini se vežejo močneje kot manjši, agregati pa celo znatno bolje kot monomeri zaradi večtočkovnega vezanja.

Najprej se v raztopino proteina doda pufer z visoko ionsko jakostjo, običajno amonijev sulfat. Ioni soli v tej raztopini zmanjšajo topnost raztopljenih snovi v vzorcu. Ko se solvacija zmanjša, izpostavljena hidrofobna območja adsorbirajo na hidrofobni membranski matrici. V HIC membrani se kot hrbtenica za fenilni ligand uporablja fleksibilna celuloza. Membrano je mogoče regenerirati z vodo ali alkoholom.

Uporaba HIC membrane za odstranjevanje:

• Agregatov
• Beljakovin gostiteljske celice
• Virusov
• Endotoksinov
• Lipidov, barvil, detergentov in sredstev proti penjenju
• Ligandov iz eluacijske kromatografije

Fenilna membrana se lahko uporablja tudi za vezavo velikih proteinov, kot so:

• Monoklonska protitelesa
• Konjugirana cepiva, virusi in fagi
• Oligonukleotidi

Prednosti:

HIC membrane nudijo naslednje prednosti v primerjavi s konvencionalnimi HIC kolonami:

• Odlična redukcija agregatov
• 85 % prihranek pufra
• 75 % prihranek časa

Enostavna uporaba:

• Plug & play naprave od 0,08 mL do 5 L
• Lahko se uporablja kot filter
• Pretok do 5 volumnov sloja/min
• Možnost ponovne uporabe (>100 ciklov) ali enkratne uporabe