Ultroser™ G zamenjava seruma
Lastnosti in prednosti:
- poldefinirana sestava, ki zagotavlja ponovljivost serije v seriji
- nizka vsebnost beljakovin
- enostaven za uporabo in shranjevanje
- ima petkrat višjo koncentracijo kot fetalni telečji serum (2 % rekonstituirane substitucije seruma Ultroser G je enako 10 % fetalnega telečjega seruma v bazalnem mediju)
- izključno za raziskovalno uporabo in ni namenjen za diagnostične postopke
Pogosto zastavljena vprašanja
Ultroser™ G je pol-definiran nadomestek za serum, ki se lahko uporablja kot zamenjava za FCS (fetalni goveji serum) oz. FBS (fetal bovine serum) v kulturah živalskih celic.
Ker je Ultroser™ G sestavljen iz biološkega izvora in kemičnih surovin, velja za pol-definiran medij.
Zasnovan je za in vitro gojenje celic, odvisnih od podlage, in je namenjen izključno za raziskave. Ni namenjen za proizvodnjo niti za uporabo pri ljudeh ali živalih.
Biološka aktivnost je 5-krat večja kot pri FBS.
Ultroser™ G je pakiran v zapečene stekleničke z liofiliziranim prahom, ki se pred uporabo rekonstituira v 20 mL.
Vsebuje komponente živalskega izvora, iz govejega in človeškega materiala. Goveji material izvira iz ZDA in/ali Nove Zelandije in je brez dokazov o boleznih.
Ne izvira iz:
- distalnega ileuma tankega črevesja ali mandljev kanadskih goved,
- možganov, lobanje, oči, trigeminalnih ganglijev, hrbtenjače, dorzalnih ganglijev, hrbtenice (vključno z repnimi vretenci, prečnimi izrastki prsnih in ledvenih vretenc ter krili križnice).
Preostale komponente so sintetičnega izvora. Sestava je zaupna in ni razkrita
Za izdelke, namenjene in vitro raziskavam, TSE/BSE izjava ni izdana.
Ultroser™ G je v obliki liofiliziranega prahu. Dostavi se pri sobni temperaturi, shranjuje pa se pri 2–8°C. Po rekonstituciji je treba raztopino hitro uporabiti ali pa razdeliti na alikvote in zamrzniti na -20°C do 6 mesecev. Pogosto zamrzovanje in odtajanje je treba izogibati.
Ultroser™ G je uporaben do 4 leta od datuma liofilizacije. Vsi kupci prejmejo izdelek z najmanj 6 meseci roka trajanja.
Po rekonstituciji ima Ultroser™ G 5-krat večjo biološko aktivnost kot FBS. Uporablja se v koncentracijah med 0,5 % in 4 % (kar ustreza 2,5 % do 20 % FBS).
Običajno se uporablja koncentracija 2 % (enakovredno 10 % FBS).
Za standardno koncentracijo zmešajte 2 % Ultroser™ G z 98 % osnovnega medija.
Za vsako celično linijo je treba testirati optimalno koncentracijo, saj učinek na rast ni vedno sorazmeren koncentraciji Ultroser™ G ali primerljiv z rezultati z uporabo FBS pod enakimi pogoji.
1. Odprite vialo tako, da zlomite vrh kapsule.
2. Dodajte 20 mL sterilne, pirogen-free destilirane vode s sterilno pipeto ali injekcijsko brizgo (skozi zamašek). Operacije morajo biti izvedene v sterilnih pogojih.
3. Pustite, da prašek nabrekne 10–15 minut. Nato ga nežno pretresite ali večkrat aspirirajte s pipeto/brizgo.
Raztopina mora biti bistra in rožnata. Po potrebi filtrirajte skozi 0,2 μm sterilni filter (brez izgube aktivnosti).
Lahko se uporabi isto gojišče kot pri FBS (npr. MEM), vendar se priporočajo obogatena gojišča: HAM’s F12, DMEM, IMDM ali RPMI.
Uporabite enako podporo kot pri FBS. Ultroser™ G vsebuje adhezijske faktorje in ga je mogoče uporabiti za predinkubacijo posod pred dodajanjem celic.
Pri zahtevnih celičnih linijah lahko izboljšate oprijem z uporabo poli-D-lizina, kolagena, zunajcelične matrike ali adhezijskih faktorjev, kot je fibronektin.
Tehnike tripsinizacije so enake kot pri FBS. Čas izpostavljenosti tripsinu naj bo čim krajši.
Za odstranitev preostalega tripsina lahko dodate inhibitor tripsina, npr. sojin izvleček ali aprotinin (0,5–1 mg/mL).
Če so celice še vedno združene, suspenzijo precedite skozi 40 μm sito.
Dve metodi:
Neposreden prenos v medij z Ultroser™ G
Postopna prilagoditev z zmanjševanjem FBS skozi več pasaž:
- pasaža: 50 % medija s serumom (MSS) + 50 % medija z Ultroser™ G (MSU)
- pasaža: 25 % MSS + 75 % MSU
- pasaža: 10 % MSS + 90 % MSU
- pasaža: 100 % MSU
Pred sejanjem celic preverite pH končnega medija in ga po potrebi prilagodite na 7,2 ± 0,1. Za izboljšanje puferske kapacitete lahko dodate natrijev bikarbonat ali HEPES.
